Для чего нужны предметные стекла покровные стекла

Покровные стекла для микроскопа – купить или нет?

Став владельцем первого микроскопа в своей жизни, мало кто задумывается о том, что еще нужно для наблюдений и исследований. А ведь в изучении микромира дополнительные аксессуары имеют не меньшее значение, чем функциональные возможности оптического прибора. Предметные и покровные стекла для микроскопа – одни из самых важных аксессуаров, необходимых каждому микробиологу. Их используют для приготовления микропрепаратов, фиксирования образцов на предметном столике и в отдельных случаях даже для фокусировки микроскопа.

Пара слов о предметных стеклах

Предметные стекла для микроскопа – небольшие и тонкие пластинки прямоугольной формы, сделанные из стекла или пластика. На них размещают образцы для исследований. У некоторых видов предметных стекол могут быть небольшие углубления в центре – они служат для удержания капель жидкости. Часто эти аксессуары уже включают в комплект поставки оптического прибора, однако предметные стекла для микроскопа можно купить и отдельно. Обычно они продаются не поштучно, а сразу наборами по 50 или 100 стекол.

Что такое комплект покровных стекол?

Покровное стекло для микроскопа – тоже небольшая и тонкая пластинка, но чаще уже квадратная. Оно располагается поверх исследуемого образца и фиксирует его в одном положении. Схема работы обычно следующая: берется предметное стекло, в его центр помещается исследуемый препарат, далее он закрывается сверху покровным стеклом. При работе с жидкостями покровные стекла также служат для настройки фокуса оптики. Обычно их делают из пластика или стекла и продают наборами по несколько десятков штук. Покровные стекла можно купить в нашем интернет-магазине в этом разделе.

Наборы готовых микропрепаратов

В продаже также можно увидеть готовые микропрепараты в наборах. Они могут быть маленькими (не более 10 штук в комплекте) или же большими, включающими до 100 разных образцов. Готовый микропрепарат – это предметное стекло, на котором уже закреплен специальным образом обработанный срез животной или растительной ткани. Сверху этот образец закрыт покровным стеклом. Преимущество готового препарата в том, что его можно сразу же изучать под микроскопом – не требуется никакой обработки или подготовки образца. Начинающим исследователям микромира мы рекомендуем вначале изучать именно такие образцы и только потом переходить к самостоятельному изготовлению препаратов.

Набор предметных стекол для микроскопа или набор микропрепаратов?

Отдельно хотим обратить ваше внимание, что не стоит путать наборы покровных и предметных стекол с наборами микропрепаратов. Первые – это отдельные прозрачные пластинки, на которых ничего нет, и с которыми вы будете работать с нуля. Вторые – это наборы предметных стекол для микроскопа, на которых уже закреплены препараты. То есть набор микропрепаратов избавит вас от необходимости их самостоятельного изготовления.

В сети магазинов «Четыре глаза» широко представлены аксессуары для микроскопов. У нас вы можете купить готовые микропрепараты и наборы для опытов, комплект покровных стекол, предметные стекла, окуляры и объективы, средства для очистки оптики и многое другое. Наши консультанты всегда готовы помочь с выбором – звоните, пишите и приезжайте в наши магазины!

4glaza.ru
Январь 2018

Статья обновлена в июне 2020 года.

Использование материала полностью для общедоступной публикации на носителях информации и любых форматов запрещено. Разрешено упоминание статьи с активной ссылкой на сайт www.4glaza.ru.

Производитель оставляет за собой право вносить любые изменения в стоимость, модельный ряд и технические характеристики или прекращать производство изделия без предварительного уведомления.

Источник

Покровное стекло и предметное стекло

Содержание Значение покровного стеклаВиды покровных стеколПредметные стекла и их виды Микроскопирование — важнейшая и неотъемлемая часть клинической диагностики. Для приготовления и исследования препаратов в лабораториях необходимо иметь набор покровных и набор предметных стекол. Значение покровного стекла Лабораторный микроскоп — дорогостоящий прибор, и окуляр является его важнейшей частью. Для предохранения линз от попадания исследуемых жидкостей требуются защитные приспособления. Толщина покровного слоя не должна превышать 0,15-0,4 мм. От наличия этой деликатной детали зависит также и качество исследования. Препарат, защищенный сверху, не высыхает и не содержит пузырьков воздуха. Еще один ответ, зачем нужно использовать покровное стекло — применение счетных камер (Горяева, Фукса-Розенталя). Несмотря на наличие в лабораториях современных анализаторов, эти надежные способы исследований не утрачивают актуальности. Виды покровных стекол В каталоге Апекслаб https://apexlab.ru/category/ представлены все существующие стекла под микроскоп. Покровные стекла имеются в размерах: 18х18;20х20;22х22;24х24;24х32;24х40;24х50;24х60. Широко употребляются стекла покровные 24 24. Это универсальный размер, но во многих случаях требуются покровные стекла, размеры которых больше или меньше. Выбор зависит от конкретной задачи, решаемой в лаборатории. Оборудование и расходные материалы, купить которые можно на сайте Апекслаб, строго соответствуют требованиям ГОСТ. Предметные стекла и их виды Для исследования под микроскопом нативный или окрашенный препарат необходимо нанести на поверхность, которая не искажает и не скрадывает прямые и преломленные световые лучи. Очень важно, чтобы в поле зрения не попали посторонние артефакты — царапины, сколы, жировая пленка. В работе требуются разные виды предметных стекол: с лункой;с двумя лунками;с обрезанным краем;со шлифованным краем;с матовой полосой для записи. Эти качества могут сочетаться. Так, например, в каталоге имеются стекла предметные со шлифованными краями и лункой. Возможны и другие комбинации. При наличии специальной матовой полосы облегчается маркировка предметных стекол. Это удобно при создании музея препаратов и для ежедневной маркировки анализов. Даже у школьников не возникает вопросов, зачем нужно использовать предметное стекло. Это обязательная комплектующая деталь любого микроскопа. Для сложных исследований крайне важно, чтобы покровное стекло и предметное стекло отвечали всем требованиям международного стандарта качества ISO 9001:2000. Именно такая продукция продается на сайте Апесклаб.

Апекслаб, ООО Лабораторное оборудование и материалы

Содержание

Микроскопирование — важнейшая и неотъемлемая часть клинической диагностики. Для приготовления и исследования препаратов в лабораториях необходимо иметь набор покровных и набор предметных стекол.

Значение покровного стекла

Лабораторный микроскоп — дорогостоящий прибор, и окуляр является его важнейшей частью. Для предохранения линз от попадания исследуемых жидкостей требуются защитные приспособления. Толщина покровного слоя не должна превышать 0,15-0,4 мм. От наличия этой деликатной детали зависит также и качество исследования. Препарат, защищенный сверху, не высыхает и не содержит пузырьков воздуха.

Еще один ответ, зачем нужно использовать покровное стекло — применение счетных камер (Горяева, Фукса-Розенталя). Несмотря на наличие в лабораториях современных анализаторов, эти надежные способы исследований не утрачивают актуальности.

Виды покровных стекол

В каталоге Апекслаб https://apexlab.ru/category/ представлены все существующие стекла под микроскоп. Покровные стекла имеются в размерах:

Широко употребляются стекла покровные 24 24. Это универсальный размер, но во многих случаях требуются покровные стекла, размеры которых больше или меньше. Выбор зависит от конкретной задачи, решаемой в лаборатории.

Оборудование и расходные материалы, купить которые можно на сайте Апекслаб, строго соответствуют требованиям ГОСТ.

Предметные стекла и их виды

Для исследования под микроскопом нативный или окрашенный препарат необходимо нанести на поверхность, которая не искажает и не скрадывает прямые и преломленные световые лучи. Очень важно, чтобы в поле зрения не попали посторонние артефакты — царапины, сколы, жировая пленка.

В работе требуются разные виды предметных стекол:

Эти качества могут сочетаться. Так, например, в каталоге имеются стекла предметные со шлифованными краями и лункой. Возможны и другие комбинации. При наличии специальной матовой полосы облегчается маркировка предметных стекол. Это удобно при создании музея препаратов и для ежедневной маркировки анализов.

Даже у школьников не возникает вопросов, зачем нужно использовать предметное стекло. Это обязательная комплектующая деталь любого микроскопа.

Для сложных исследований крайне важно, чтобы покровное стекло и предметное стекло отвечали всем требованиям международного стандарта качества ISO 9001:2000. Именно такая продукция продается на сайте Апесклаб.

Источник

Виды стеклопрепаратов

В данной главе расскажем о предметных и покровных стеклах и стандартных микроскопических препаратах.

Предметное и покровное стекла

Для многих видов исследований с помощью биологического микроскоп пригодны различные варианты предметных стекол, имеющиеся в продаже.

В некоторых масляно-иммерсионных темнопольных методиках крайне важной является идеальная толщина; такие стекла продаются.

Покровное стекло: Пластиковые покровные стекла категорически не рекомендуется использовать. Единственная причина, по которой используют пластиковые покровные стекла – это то, что их можно мыть и повторно использовать; в некоторых школах практикуется повторное использование даже предметных стекол. По большей части это утверждение относится к начальным школам, иногда к средним школам — и никогда к университетам.

Порой автор данных слов ощущает себя «гласом вопиющего в пустыне» по поводу использования покровных стекол надлежащего качества. Обычно встречаются покровные стекла классов №1 или №2, в то время как надлежит использовать стекла класса №1.5!

Тот, кто покупает покровные стекла класса №1, полагает, что за свои деньги получает лучшую из имеющихся альтернатив. Тот, кто покупает стекла класса №2, думает, что они не такие хрупкие, и использует их с большей отдачей.

Толщина покровных стекол: класс №1 от 0.13 до 0.17 мм; №1.5 от 0.16 до 0.19 мм; №2 от 0.17 до 0.25 мм.

Почти все производители микроскопов разрабатывают объективы на толщину покровного стекла 0.17 мм. Такие стекла могут попадаться и в классе №1 и в классе №2. Но больше всего покровных стекол оптимальной толщины в классе №1.5. Должны ли мы быть принципиальными в вопросе использования покровных стекол. Думаю, да. Кто-нибудь может случайно попасть в серьезную беду без всякого на это желания!

Существует возможность приобрести масляно-иммерсионные объективы с регулировкой под толщину покровных стекол. Предполагается, что это свойство наиболее важно при больших увеличениях; в то же время замечено, что ценность этой функции снижается вместе со снижением степени увеличения. Данная регулировка встречается в некоторых исследовательских микроскопах.

Применение стандартного препарата

Позвольте внести некоторую объективность в область микроскопии и помочь вам в стандартизации при работе с микроскопом. Гематологические, биохимические и иммуноферментные анализаторы ежедневно тестируются по стандартному образцу. Прибор или показывает правильный ответ, или им не пользуются, пока его не починят. При этом обеспечивается объективность, невозможная при микроскопии.

Есть две причины, по которым рекомендуется использовать стандартный препарат: ежедневная проверка работы микроскопа и оценка микроскопов других марок и моделей.

Выберите интересующий вас препарат с различными характеристиками: хорошим примером служит лёгочная ткань, но можно использовать и многие другие ткани. Они должны быть окрашены гематоксилином и эозином. Ежедневное использование этого препарата для проверки микроскопа позволит вам хорошо запомнить его структуры и особенности в зависимости от положения ирисовой диафрагмы конденсора.

Ежедневная проверка: Используйте 10Х объектив; поднимите конденсор до конца (до соприкосновения с нижней поверхностью предметного стекла ), затем опустите на 0.5 мм. Сфокусируйте препарат, настройте раскрытие полевой и апертурной диафрагм.

Горизонтальное смещение препарата: Во время фокусировки с 10Х объективом следите за горизонтальным перемещением препарата в любом направлении. Изображение должно находиться чётко в фокусе (без расплывчатости и горизонтального смещения).

Эти шаги должны были устранить горизонтальное смещение. Если оно было устранено, то микроскоп готов к ежедневной работе.

Если проблема заключалась в пункте (3), тогда надо отцентрировать конденсор, что возможно. Проблема может быть в оправе, в которой закреплен конденсор. Конденсор в оправе может быть установлен неровно или неплотно. Понаблюдайте за техническим работником, исправляющим неполадки, чтобы в дальнейшем вы сами могли решить проблему, если она снова появится.

Разрешающая способность микроскопа: Убедитесь, что все характерные детали, которые вы обычно наблюдаете на стандартном препарате, присутствуют на нём. Удостоверьтесь, что вы правильно настроили ирисовую диафрагму конденсора. Также проверьте работу 40Х и 100Х объективов.

Если изображение затуманено или загрязнено, то причина может быть в масляной пленке на фронтальной линзе, оставшейся после чистки ксилолом или другими растворителями на основе бензина. Спирты (метанол, этанол, изопропил) чистят так же, как и ксилол, но они менее резкие и не оставляют масляной плёнки. Также могут использоваться и другие растворители. Помните, что растворитель надо наносить на протирочную бумагу, а не на саму линзу, используйте растворитель экономно.

Если вы чётко видите стандартный препарат со всеми характерными чертами, микроскоп готов к ежедневной работе.

Оценка микроскопа: Используйте стандартный препарат для сравнения и оценки других микроскопов. Делайте это на вашем рабочем месте или на выставках, на которых экспонируются микроскопы. Всегда посещайте такие мероприятия и сравнивайте микроскопы.

В тот момент, когда вы будете смотреть в незнакомый микроскоп (перед тем, как вы будете наблюдать свой препарат через него), вы должны учесть две вещи.

Если есть устройство между бинокулярной насадкой и корпусом микроскопа, убедитесь, что оно находится в положении исследования в светлом поле.

Затем осмотрите конденсор на наличие дополнительных линз. Если есть линза под конденсором, то она предназначена для работы с объективами малого увеличения, включая 10Х объектив. Если линза находится над конденсором, то тогда она предназначена для работы с объективами 40Х и 100Х. С того момента, как вы начнёте работу с 10Х объективом, нижняя линза должна находится в оптическом пути или верхняя линза должна быть убрана из оптического пути. Максимально поднимите конденсор, затем опустите его на 0.5 мм. Конденсоры никогда не имеют сразу оба типа указанных выше линз, есть только один тип.

Обратитесь за разрешением на использование стандартного препарата вместо того, что уже установлен в микроскопе. Если вы не видите деталей препарата, которые вы хотели бы увидеть, удостоверьтесь, что микроскоп исправен. Если да, тогда этот микроскоп хуже, чем тот, который у вас уже есть. Не тратьте на него время, но всё же запомните марку и модель на будущее. Наоборот, если вы видите больше, чем было раньше, с лучшим разрешением и контрастом, тогда вы нашли микроскоп лучше того, что был у вас. Уточните, почему этот микроскоп лучше вашего. Спросите про объективы, конденсоры, окуляры и т.д. И что может быть добавлено к нему, например, фазовый контраст, тёмное поле, интерференционный контраст, флуоресценция, и т.д. Даже если вы не собираетесь покупать новый микроскоп, вы можете накопить нужную информацию, чтобы в дальнейшем совершить покупку нужной вам модели.

Микроскопы очень индивидуальны. Рассматривайте незнакомый вам микроскоп с позиции удобства в использовании. Удобно ли вам за ним сидеть? Удобны и просты ли в использовании винты фокусировки и рукоятки перемещения предметного столика? Подходит ли вам угол наклона окуляров? Великоват ли он и требуется ли его уменьшить, чтобы вам стало комфортнее?

Смотрите в более совершенные микроскопы, даже если вам не очень комфортно за ним сидеть. Вы должны научиться всему, чему сможете, и должны уметь оценивать преимущества в оптике, даже если вам это не нравится.

Наконец, это уверит вас в приобретении и использовании стандартного препарата. Если вы также хотите проверить плоскостность поля зрения, примените цитологический препарат и поместите его под покровное стекло для устойчивости препарата.

Картонная коробочка подойдет для хранения одного, двух или более стандартных препаратов.

До сих пор мы концентрировались на светлопольной микроскопии, с этого момента она должна стать для вас простой и понятной. Теперь мы можем подумать о других методах, используемых в микроскопии.

Такие методы, как тёмное поле, флуоресценция, фазовый контраст, дифференциальный интерференционный контраст по Номарскому выполняются с помощью светлопольного микроскопа, но для этого надо установить дополнительные принадлежности и проверить правильность работы микроскопа. Такая проверка осуществляется до перехода к работе другими методами.

В следующий раз сделаем обзор специализированных микроскопов. После чего перейдем теме обслуживания микроскопов и приемам его настройки.

Источник

ПРЕДМЕТНОЕ СТЕКЛО

Полезное

Смотреть что такое «ПРЕДМЕТНОЕ СТЕКЛО» в других словарях:

Предметное стекло — Стекло, на которое наклеивается срез материала, по «размерам соответствующее расстоянию между захватами объектодер жателя Источник: ГОСТ 22023 76: Материалы строительные. Метод микроскопического количественного анализа структуры … Словарь-справочник терминов нормативно-технической документации

предметное стекло — — [Англо русский геммологический словарь. Красноярск, КрасБерри. 2007.] Тематики геммология и ювелирное производство EN microscope glass … Справочник технического переводчика

предметное стекло — objektinis stiklelis statusas T sritis chemija apibrėžtis Stiklelis, ant kurio dedamas pro mikroskopą stebimas daiktas. atitikmenys: angl. objective glass rus. предметное стекло … Chemijos terminų aiškinamasis žodynas

предметное стекло — стеклянная пластинка, на которой размещают исследуемый объект при микроскопии … Большой медицинский словарь

Предметное стекло — см. Объектив … Энциклопедический словарь Ф.А. Брокгауза и И.А. Ефрона

предметное стекло светового микроскопа — предметное стекло Стеклянная пластинка, предназначенная для размещения микропрепарата светового микроскопа. [ГОСТ 28489 90] Тематики микроскопы Обобщающие термины принадлежности световых микроскопов Синонимы предметное стекло EN slide DE… … Справочник технического переводчика

предметное стекло микроскопа — — [http://slovarionline.ru/anglo russkiy slovar neftegazovoy promyishlennosti/] Тематики нефтегазовая промышленность EN glass microscope slide … Справочник технического переводчика

Предметное стекло светового микроскопа — 38. Предметное стекло светового микроскопа Предметное стекло D. Objektträger E. Slide F. Porte objet Стеклянная пластинка, предназначенная для размещения микропрепарата светового микроскопа Источник: ГОСТ 28489 90: Микроскопы световые. Термины и… … Словарь-справочник терминов нормативно-технической документации

Стекло Покровное (Coverslip) — очень тонкая стеклянная пластинка квадратной или округлой формы, накладываемая для защиты препарата, помещенного на предметное стекло. Источник: Медицинский словарь … Медицинские термины

СТЕКЛО ПОКРОВНОЕ — (coverslip) очень тонкая стеклянная пластинка квадратной или округлой формы, накладываемая для защиты препарата, помещенного на предметное стекло … Толковый словарь по медицине

Источник

Приготовление препаратов для микроскопирования

	Практические советы Витальное окрашивание Прижизненное окрашивание Домашняя лаборатория Занимательная микроскопия Изготовление микропрепаратов Камера Горяева Классификация и маркировка объективов микроскопов Комбинации цветных стекол для выделения спектра Методы микроскопирования Методы исследования простейших Методы и приемы биологического эксперимента Микроскопия для начинающих Микроскопические измерения Модификации контрастной окраски по Граму Необходимое оборудование Общие методы заключения препаратов Организация и оснащение гистологической лаборатории Освещение по Келлеру Подготовка предметных стекол Поляризационная микроскопия Правила работы с микроскопом Правила ведения лабораторного журнала Приобретение микроскопа Приготовление микропрепаратов членистоногих Техника приготовления гистологических препаратов Фототубус для цифровых камер Формидрон инструкция по применению

	Приготовление препаратов для микроскопирования Препараты для микроскопирования готовят из крови, колоний бактерий, тканей животных и растений и др. В некоторых случаях приготовление препаратов несложно, в других — требует специальной техники. Наиболее просто готовят так называемые нативные препараты, т. е. объекты в естественном их виде. В этом случае материал наносят на предметное стекло и покрывают тонким покровным стеклом. Иногда его смешивают с изотоническим раствором хлорида натрия или глицерином для разжижения, осветления и предохранения от высыхания. Широко распространен метод окраски препаратов для микроскопирования. Способ окраски зависит от особенностей исследуемого материала и цели исследования. Различные части препарата воспринимают краску по-разному, что делает их более четкими, позволяет отличить друг от друга отдельные структуры. Например, мазки крови окрашиваются азур-эозином для подсчета лейкоцитарной формулы, фуксином — для подсчета тромбоцитов, азуром II—для подсчета ретикулоцитов. Для бактериоскопии — излучения под микроскопом микроорганизмов — существует большое количество методов окраски, в том числе и сложных — двумя и более красителями. Существует негативный метод окраски, т. е. окрашивается фон препарата, на котором отчетливо видны неокрашенные микроорганизмы, например бледная трепонема. Препарат для микроскопии не может быть толстым или плотным, так как свет должен хорошо проходить сквозь него, поэтому приготовление гистологических препаратов из тканей требует довольно сложной техники. Ткань обрабатывают спиртами, формалином или фиксирующими смесями, пропитывают целлоидином, парафином или желатином. Затем получают тончайшие срезы ткани при помощи специального прибора — микротома. После этого срезы окрашивают гематоксилин-эозином, Суданом, сложными смесями красителей, серебром и т. д. Срезы закрепляют на предметных стеклах смесью белка с глицерином. Для сохранения препаратов срезы заливают канадским бальзамом и покрывают покровным стеклом. Бальзам засыхает и гистологический препарат может храниться в течение многих лет. Методика приготовления временных препаратов Для изучения живых клеток микроорганизмов применяют препараты “раздавленная капля”, “висячая капля”, “отпечаток”, “агаровая пленка” (“микрокультура”). Препараты живых клеток рассматривают с “сухими системами ” микроскопа. Препараты, работа с которыми уже закончена, прежде чем вымыть, выдерживают в дезинфицирующем растворе. Микропрепараты позволяют проводить широкий ряд опытов. Они предназначены для детального изучения микроскопических структур под микроскопом. Способы приготовления временных микропрепаратов. 1. Возьмите предметное стекло и, держа его за боковые грани, положите на стол. 2. Положите в центр стекла объект исследования (тонкие волокна ваты). 3. В пипетку наберите немного воды из стаканчика и нанесите на препарат 1-2 капли. 4. Возьмите за боковые грани покровное стекло и положите его сверху на предметное стекло (рис.). 5. Если жидкости много, и она вытекает из-под покровного стекла, удалить ее при помощи фильтровальной бумаги. Если же под покровным стеклом остались места, заполненные воздухом, то добавить жидкость, поместив ее каплю рядом с краем покровного стекла, а с противоположной стороны фильтровальную бумагу Этапы приготовление микропрепарата. Накрывание объекта покровным стеклом. Препарат устьиц клеток растения. Приготавливают несколько срезов нижней эпидермы листа и помещают их на 2 часа в 5 %-ный раствор глицерина. Срезы помещают на предметное стекло в том же растворе. Рассматривают препарат. Затем заменяют глицерин на воду, оттягивая его из-под стекла фильтровальной бумагой. Смотрят, что изменилось. После этого воду заменяют 20%-ным раствором глицерина или 1М раствором сахарозы. Наблюдают изменения Приготовление 1 М раствора САХАРОЗЫ. Молярная концентрация C(B) показывает, сколько моль растворённого вещества содержится в 1 литре раствора. C(B) = n(B) / V = m(B) / (M(B) · V), Какую массу САХАРОЗЫ C12H22O11 нужно взять для приготовления 0,1 литра 1,0 М раствора? M(C12H22O11) = C(C12H22O11) · V · M(C12H22O11) = 1 моль/л · 0,1 л · 342,29 г/моль » 34,229 г Таким образом, для приготовления 0,1 литра 1 М раствора нужно взять 34,229 г и растворить в воде, а объём довести до 0,1 литра( довести до 100 мл). Концентрацию раствора можно выразить количеством молей растворённого вещества в 1000 г растворителя. Такое выражение концентрации называют моляльностью раствора. Препарат КЛЕТКИ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧНИ ПОЛОСТИ РТА Для работы нужны: микроскоп, предметное и покровное стекла, препаровальная игла, скальпель, пипетка, 0,9-процентный раствор NaCl (физиологический раствор), подкрашенный метиленовой синью или чернилами, спирт, вата. 1.Тщательно протрите нетканной салфеткой предметное и покровное стекла. 2.При помощи пипетки нанесите на предметное стекло капельку подкрашенного метиленовым синим, физиологического раствора. 3.Протерев ручку скальпеля спиртом, проведите ею (не лезвием!) несколько раз по внутренней поверхности щеки или нижней губы. Вы снимете немного слизи вместе со слущившимися клетками слизистой оболочки полости рта. 4.Перенесите эту слизь в каплю на предметном стекле при помощи препаровальной иглы, осторожно смешайте слизь с подкрашенным раствором и накройте препарат покровным стеклом. 5.Поместите препарат под микроскоп и рассмотрите его. Найдите слегка окрасившиеся клетки. Рассмотрите в них бледно окрашенную цитоплазму и более темное ядро. 6.Зарисуйте рассмотренные вами клетки в тетради и сделайте надписи.

	Методика приготовления постоянных микропрепаратов Как понятно из заголовка отличие временного препарата, который может храниться относительно не долгий отрезок времени, постоянный препарат может храниться многие годы. Существуют готовые наборы для изготовления постоянных препаратов, один из таких наборов изображен ниже. Конечно, данный набор имеет свои ограничения для изготовления препаратов. Обязательным условием для долгосрочного хранения препарата из растительного или животного материала является его фиксация. Фиксирующих жидкостей много, самые доступные из них: этиловый спирт и продающийся в аптеках препарат на основе формалина (Формидрон) Состав: 100 мл препарата содержат 10 г раствора формальдегида в пересчете на 37 % формальдегид; вспомогательные вещества: спирт этиловый 96 %, одеколон, вода очищенная. Препарат ФОРМИДРОН, может быть использован для создания архива биологических объектов, вспомогательные вещества входящие в аптечный препарат, не сколько не мешают в сохранении объекта. ВНИМАНИЕ ФОРМАЛЬДЕГИД ОБЛАДАЕТ РАЗДРАЖАЮЩИМ ДЕЙСТВИЕМ. Если на дне банки с 40 % формалином образовался осадок белого цвета (параформальдегид), то его можно растворить, подогрев до 70-80 °С (в вытяжном шкафу! или на открытом воздухе), и использовать для фиксации. ПРАВИЛА РАБОТЫ С ФИКСАТОРАМИ Практически все фиксаторы относятся к токсичным веществам поэтому необходимо соблюдать правила техники безопасности при работе с реактивами. Фиксация необходима с целью остановки (прекращения) жизнедеятельности клеток. Для этого объект помещают в соответствующий фиксатор на время от нескольких минут до нескольких часов. ЗАКЛЮЧЕНИЕ ПРЕПАРАТА ПОД ПОКРОВНОЕ СТЕКЛО Большинство используемых в цитологии и гистологии красителей представляет собой водные растворы. Чтобы сделать временный препарат, срез, вынув из водного раствора красителя, промывают и заключают в глицерин. Приготовить постоянный препарат несколько сложнее: необходимо покрыть срезы покровным стеклом, заключив их в прозрачную затвердевающую среду. Можно, ополоснув срезы дистиллированной водой, капнуть на них разогретый раствор желатины. Но большую сохранность и лучшее качество препаратов можно получить, заключив их в канадский бальзам (прозрачную смолу пихты с показателем преломления n= 1,535). Поскольку канадский бальзам не смешивается с водой, но растворим в ксилоле (толуоле, бензоле), создается необходимость провести препарат по «проводке» для срезов, но в направлении, противоположном тому, в которое стекла велись для удаления парафина и подготовке к окраске. При этом нужно помнить, что даже незначительное присутствие воды в срезе сделает препарат мутным, непригодным для изучения. Поэтому переносить срезы по проводке от воды к толуолу надо медленно, погружая стекло в стаканчик со спиртом или толуолом на 2—3 мин. Схема проведения срезов может быть следующей: дистиллированная вода — ополоснуть, спирт 70%-ный — 2 мин, Надо иметь в виду, что некоторые красители легко вымываются из препаратов как в воде, так и в спиртах. Поэтому в некоторых случаях приходится избегать промывки препаратов и проведения через спирты низких концентраций. Чтобы достигнуть обезвоживания, приходится препараты осторожно промокать фильтровальной бумагой, опуская их сразу в 96%- или 100%-ный спирт, можно заменять этиловые спирты ацетоном или изоамиловым спиртом. Итак, задача, которая стоит при подготовке препарата для монтирования его под покровное стекло, состоит в том, чтобы, не вымыв красителя, добиться полного обезвоживания среза. Достигается это проводкой по спиртам возрастающей крепости, вплоть до 100%. Обработка срезов ксилолом имеет двоякое значение: с одной стороны, в нем достигается просветление препарата, усиливается его прозрачность (краситель при этом из препарата не вымывается), с другой стороны, создаются благоприятные условия для дальнейшего пропитывания среза канадским бальзамом, который растворим в ксилоле. Само заключение среза под покровное стекло осуществляется быстро, пока на препарате не испарился ксилол. Капля бальзама наносится на покровное стекло (оно должно быть чистым и сухим), и покровное стекло быстро перевертывается над срезом. Можно капать бальзам на предметное стекло на поверхность среза и быстро покрывать его покровным стеклом. Канадский бальзам должен иметь консистенцию растительного масла (или гуще). Через 1—2 дня бальзам застывает. Вместо канадского бальзама можно использовать синтетическую среду на основе полистирола. Для этого берут 25г бесцветного полистирола, 5 мл дибутилфталата (пластификатор может быть любой) и доливают ксилолом до 100 мл. Раствор должен иметь консистенцию меда. Заключение среза под покровное стекло не отличается, от выше описанного. Несомненным плюсом синтетического бальзама это инертность и более лучшая сохранность красителей. Этапы приготовления постоянного микропрепарата Изучаемый объект помещают в раствор 1части ФОРМИДРОНА с 2 частями воды на несколько дней. Для мазков это время ограничивается 15 минутами и формидрон разводить не следует. В случае использования этилового спирта время фиксации составляет 15-20 мин. После фиксации объект следует отмыть от фиксатора, для этого его помещают на несколько часов в проточную воду. Для удержания объекта при отмывке удобно поместить его в ситечко-шарик для заваривания чая. Исследуемый объект переносят в батарею спиртов с целью удаления воды. Мазки ополаскивают в проточной воде в течение 3-5 минут. Струя воды должна быть не сильной, мазок сушат. Далее если необходимо препарат может быть окрашен одним из доступных вам красителей. После окраски препарат готовят к заключению в монтирующую среду. Приготовить батарею ( ряд флаконов ) растворов спиртов возрастающей крепости для удаления воды. Возможно использовать как этиловый спирт (антисептический раствор) так и Изопропиловый спирт (ИПС) который можно приобрести в магазинах специализирующихся на продаже радиодеталей. Последовательно наливаем в лабораторные стаканчики этанол или изопропанол в концентрациях 50%, 70%, 96%, 99%. Объект помещают в стаканчик, начиная с 50% этанолом на 10 минут. Затем перемещают объект в стаканчики с все более высокой концентрацией спирта, выдерживая в каждом по 10 минут. В процессе такого перемещения этанол будет плавно вытягивать воду из объекта. Помещать объекты сразу в концентрированный этанол нельзя, так как в этом случае, быстро выходящая из клеток вода может повредить клеточные оболочки Если Вы хотите заключить препарат в канадский бальзам, обезвоженный материал переносят в уайт-спирит или ксилол на 5-6 часов, Канадский бальзам можно заменить на раствор канифоли в уайт-спирите(ксилоле), по консистенции напоминающий сироп. Если препарат заключается в глицерин-желатиновую смесь, то объект переносят не уайт-спирит, а в глицерин на несколько часов ( глицерин, аптечный) Заключение объекта в глицерин-желатин. Последний приготовляется следующим образом. Чистый желатин (7 г) размачивают в течение 2—3 ч в 42 см3 дистиллированной воды, добавляют 50 г глицерина и 0,5 г кристаллической карболовой кислоты. Все вместе нагревается при помешивании на водяной бане, фильтруется и охлаждается. При появлении осадка тщательно профильтровать через стекловату. Готовый «глицерин-желатин» хранить в герметичном сосуде. При комнатной температуре глицерин-желатин застывает. Небольшой кусочек глицерин-желатина иглой или скальпелем переносят на предметное стекло. Последнее слегка нагревают на пламени спиртовки, глицерин-желатин расплавляется. В него из глицерина переносится объект и покрывается покровным стеклом. Мазок заключают следующим образом, кусочек глицерин-желатина помещают на покровное стекло Последнее слегка нагревают на спиртовке, глицерин-желатин расплавляется, объект покрывается покровным стеклом. Пространство между предметным и покровным стеклом заполняется монтирующей средой, которая, закрепляет покровное и предметное стекла и консервирует объект. Самым главным требованием к монтирующей среде является соответствие ее коэффициента преломления света к аналогичному показателю стекла. Заключение объекта в канифоль или канадский бальзам На покровное стекло по центру наносят каплю или, если стекло длинное, две капли жидкого раствора канифоли. Покровное стекло помещают каплей вниз и слегка прижимают Края покровного стекла не следует вытирать ватой или марлей, смоченной ксилолом, так как при этом часть смолы может растечься по чистой поверхности покровного стекла. Засыхая, она образует неровности, которые мешают наблюдению под микроскопом и от которых очень трудно избавиться. В результате неполного обезвоживания в окрашенных заключенных препаратах часто образуются непрозрачные или мутные зоны. Под микроскопом в таком участке среза и над ним обнаруживаются многочисленные мелкие капельки воды, окраска сильно выцветает. Чтобы избавиться от этого, снимают покровное стекло, смывают ксилолом синтетическую смолу или бальзам, обезвоживают срез в 100%-ном спирте, ацетоне или изопропиловом спирте, просветляют в смеси ксилола с обезвоживающим агентом и в 2-3 сменах свежего ксилола и вновь заключают. Синтетическая монтирующая среда на основе полистирола. Полистирол (бесцветный)-25г.(можно использовать пищевые стаканчики) Дибутилфталат-5мл (любой доступный пластификатор, если не добавлять, полистирол трескается после высыхания) Растворение происходит в течение нескольких дней, раствор должен иметь консистенцию меда.

	Методика изготовления мазка-отпечатка. Различают «сухие» и «влажные» мазки. Первые имеют ограниченное применение и используются почти исключительно при изучении крови и кровепаразитов. «Влажные» мазки применяются часто главным образом при изучении паразитических простейших, а также и в других случаях. Мазки изготовляются следующим образом. Пинцетом берут тот орган, из которого предполагается сделать мазок, и «намазывают» на покровное стекло. Мазок должен быть совершенно равномерным и одинаковой толщины на всем покровном стекле. Если этого достигнуть сразу не удалось, то при помощи препаровальной иглы можно частично исправить мазок. Не давая подсохнуть мазку, покровное стекло опускают мазком вниз на теплый этиловый спирт, предварительно налитый в часовое стекло или солонку. Происходит быстрая коагуляция тканевых элементов, и мазок плотно пристает к стеклу. Дальнейшая обработка мазка та же, что и тотальных препаратов. После фиксатора следуют промывка в 70° спирте, вторичная промывка в спирте, перенос в воду, окраска, отмывка в воде; спирты возрастающей крепости, ксилол, бальзам (полистирол). Методика изготовления мазка-отпечатка из печени рыбы: 1. рыбу декапитировать хирургическими ножницами; 3. печень рассечь лезвием и осторожно осушить поверхность разреза фильтровальной бумагой; 4. обезжиренное стекло слегка нагреть над пламенем спиртовки и коснуться поверхности разреза; 5. мазок высушить на воздухе и окрасить любым доступным красителем.

Мазки крови для исследования лейкоцитарной формулы готовят следующим образом. Поместить небольшую каплю венозной крови на предметное стекло, с помощью стеклянной капиллярной пипетки, (или непосредственно из места укола пальца перенесите выступившую каплю крови на конец стерильного предметного стекла. Избегайте при этом всякого контакта между проколотым участком кожи и стеклом.) Оставляют стекло в горизонтальном положении. Размазывают каплю крови по стеклу с помощью чистого шлифованного стекла, помещая его под углом 45°; коротким ребром, подождав, пока вся кровь расплывется по нему Как только кровь растеклась по ребру, быстрым движением от капли проводят по предметному стеклу. Не следует сильно нажимать на стекло, так как при этом травмируются форменные элементы крови. Шаг 4. После приготовления мазки быстро сушат на воздухе до исчезновения влажного блеска. Подсушить мазок можно, подержав его над абажуром лампы или помахав им в воздухе. Хорошо сделанный мазок тонок, имеет желтоватый цвет и оканчивается «метелочкой». Густо-розовые и красноватые мазки непригодны для счета, так как они слишком толсты и клеточные элементы при этом дифференцировать невозможно.При медленном высыхании может изменяться морфология клеток. Мазок 2 – В момент размазывания мазка произошла остановка. Мазок 3 – Перекос мазка.

	Для приготовления мазка из гноя или мокроты используют два предметных стекла. Небольшое количество материала переносят стерильной петлей или иглой на середину предметного стекла и покрывают вторым так, чтобы осталась свободной треть первого и второго стекол. Стекла раздвигают в стороны и получают два больших мазка одинаковой толщины.

	Объекты фиксируются в центрифужной пробирке. В ней же осуществляется и вся дальнейшая смена жидкостей вплоть до просветления. При этом перед каждой сменой жидкости производится центрифугирование. Из просветляющей жидкости со дна центрифужной пробирки объекты при помощи пипетки переносятся на предметное стекло в каплю бальзама. Метод центрифугирования применяется очень часто, например при изготовлении препаратов простейших. Источник Популярная книга Круть доступна для чтения прямо сейчас на нашем сайте boochi.ru. Скачать книгу в формате FB2, TXT, PDF, EPUB бесплатно без регистрации. → Вам также понравится Для чего дует ветер 18.04.202219.04.2022 admin 0 Диурез что это такое простыми словами 18.04.202219.04.2022 admin 0 Founders edition что это значит 18.04.202218.04.2022 admin 0 Добавить комментарий Отменить ответ Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены * Комментарий * Имя * Email * Сохранить моё имя, email и адрес сайта в этом браузере для последующих моих комментариев.