Днк candida albicans обнаружено что это
Днк candida albicans обнаружено что это
Это молекулярно-генетическое исследование, позволяющее выявить генетический материал грибов Candida albicans – возбудителей кандидоза.
C. albicans, NAA (DNA, PCR).
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Мазок из зева (ротоглотки), первую порцию утренней мочи, соскоб из прямой кишки, соскоб урогенитальный.
Общая информация об исследовании
Данный микроорганизм относится к условно-патогенным, т. е. в умеренных количествах является нормальной частью микрофлоры и вызывает заболевания только при избытке. Чрезмерному росту этих микроскопических грибов препятствует нормальная бактериальная флора кожи и слизистых, а также защитные факторы организма. Заболевание, вызванное грибами рода Candida, – кандидоз возникает при нарушениях иммунных механизмов защиты.
Причиной возникновения кандидоза может явиться иммуносупрессивная терапия, пересадка донорских органов, лечение кортикостероидами, радиационные поражения, бесконтрольное применение антибиотиков, злокачественные новообразования, длительное применение контрацептивов. Кандидоз часто развивается на фоне сахарного диабета, дисфункции щитовидной и паращитовидных желез. Особое значение имеет кандидоз при ВИЧ-инфекции, он входит в число СПИД-маркерных инфекций – у человека с нормально функционирующим иммунитетом не развивается. 90 % больных СПИДом на той или иной стадии заболевают кандидозом.
Кандидозный вульвовагинит – молочница – очень распространенное заболевание среди женщин детородного возраста: около 75 % всех женщин в течение жизни переносят хотя бы один эпизод острого кандидоза вульвы и влагалища. У мужчин сахарный диабет и/или несоблюдение личной гигиены может привести к развитию кандидозного баланопостита – воспаления головки и крайней плоти полового члена. И, хотя кандидоз не относится к инфекциям, передающимся половым путем, незащищенный половой контакт при остром или хроническом вульвовагините может привести к воспалению полового органа мужчины.
Возможен также кандидоз мочевыводящих путей, который развивается чаще как внутрибольничная инфекция. Факторами риска в данном случае являются сахарный диабет, катетеризация мочевого пузыря, мочекаменная болезнь, длительное применение антибиотиков широкого спектра действия. Пациенты при этом жалуются на частые болезненные мочеиспускания.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Причины положительного результата:
Причины отрицательного результата:
Вагинальный кандидоз — дифференцированный подход к терапии
Марина Поздеева о подборе лечения при вагинальном кандидозе
Вагинальный кандидоз (ВК) — распространенное заболевание, которое развивается у 70—75% женщин по крайней мере однажды в течение репродуктивного периода (по данным исследований под руководством Жерома Собеля, опубликованных в 1998 г, США). У 40—50% пациенток наблюдаются повторные случаи заболевания, а примерно 5% страдают от рецидивирующей инфекции (данные исследования 2004 г. на базе Колледжа медицины им.Альберта Энштейна, Бронкс, США).
Этиология ВК
В России, США, Австралии и Европе у женщин с ВК чаще всего выявляется Candida albicans (76—89%). За ним следует C. glabrata (7—16%). Процент не-albicans Candida колеблется от 11 до 24%. Некоторые исследования показали тенденцию к увеличению частоты не-albicans кандидозов, однако недавняя работа ученых из США с участием девяноста тысяч образцов опровергла это утверждение: соотношение видов Candida, вызывающих ВК, с 2003 по 2007 год практически не изменялось.
Этиологически различные кандидозы клинически весьма схожи, однако нетипичные возбудители характеризуются устойчивостью к азоловым антимикотикам. Более других к азоловыми противогрибковым препаратам резистентны C. glabrata и C. krusei.
провизор первой категории и заведующая аптекой. Автор многочисленных работ по фармакологии и фармакотерапии, город Днепропетровск.
Эти данные подчеркивают важность определения вида Candida spp. у женщин с высоким риском развития не-Сandida аlbicans-ассоциированного ВК с целью подбора эффективной терапии заболевания.
Факторы риска
Тесная одежда и нижнее белье обычно не провоцируют заболевания. Однако среди женщин с рецидивирующим ВК (РВК) ношение тесных колготок и ежедневных прокладок положительно ассоциировано с рецидивом.
К биологическим факторам риска ВК относятся:
Антибактериальные препараты способствуют снижению количества лакто- и бифидобактерий, сдвигу pH во влагалище и росту Candida spp.
Тетрациклины, цефалоспорины и ампициллин чаще других антибиотиков широкого спектра действия провоцируют развитие кандидоза.
Беременность — один из наиболее распространенных предрасполагающих факторов. Согласно исследованиям, у трети беременных развивается ВК. Высокий уровень половых гормонов способствует увеличению содержания гликогена во влагалище, который в свою очередь обеспечивает постоянный источник углерода, необходимый для роста грибов.
Кроме того, повышенная кислотность вагинальной флоры беременных может подавлять рост других микроорганизмов, которые естественным образом ингибируют Candida. Хотя начальное прикрепление клеток гриба происходит при более высоких значениях pH (6–7), кислая среда благоприятствует развитию мицелия.
В патогенезе вагинального кандидоза (ВК) выделяют две основные фазы: фазу адгезии, то есть прикрепления клеток гриба к эпителиальным клеткам, и мицелиальную фазу. Мицелиальная фаза начинается с момента проникновения Candida spp. в эпителиоциты. Растущий псевдомицелий грибов проникает в глубокие слои цервикального и вагинального эпителия.
Cаndida способны пенетрировать клетки, не нарушая целостности своей маннопротеиновой оболочки (это фибриллярное покрытие клеточной стенки гриба, участвующего в адгезионных процессах). В итоге Cаndida противостоит факторам защиты и выживает в макроорганизме.
Группы риска инфицирования не-albicans видами Candida включают:
Во всех вышеперечисленных группах наиболее распространенным видом является С. glabrata.
Процент случаев заболевания не-albicans Сandida-ассоциированной инфекцией увеличивается с возрастом женщин.
Большинство женщин с ВК быстро реагируют на терапию, однако в некоторых случаях может развиться рецидивирующая форма, которая характеризуется четырьмя и более эпизодами инфекции в год. Предрасполагающие факторы:
Исследования доказали, что у пациенток с РВК регистрируется более высокая частота специфических генных полиморфизмов по сравнению с контрольной группой. Кроме того, у этих пациенток обнаруживаются определенные антигены системы Льюис в крови.
Периодический ВК может быть также связан со снижением в естественных условиях концентрации манноз-связывающего лектина. Последний, связываясь с сахарами на поверхности клетки Candida, запускает путь активации системы комплемента и приводит к гибели гриба с помощью комплемент-опосредованного фагоцитоза.
При данном заболевании также фиксируется повышенная концентрация интерлейкина-4, что тормозит местные защитные механизмы.
Система антигенов Льюис зависит от группы генов, которые экспрессируются в железистом эпителии. Антигены Льюис, в отличие от эритроцитарных антигенов, являются компонентами экзокринных эпителиальных выделений, в том числе и влагалищных.
Роль полового пути передачи остается недоказанной. Тем не менее большинство исследований говорит о необходимости лечения половых партнеров. Так, эксперимент доктора Горовитц, Великобритания, продемонстрировал наличие видов Candida в эякуляте мужчин, партнерши которых страдали РВК.
Однако тот же Горовитц провел еще одно исследование, где изучались результаты терапии у 54 женщин, разделенных на две группы. Партнеров из первой группы подвергали противогрибковой терапии, а из второй — нет. Существенных различий в скорости наступления рецидива у женщин этих групп обнаружено не было.
Рецидивы могут быть вызваны и другими видами Candida, которые не являются в равной степени чувствительными к терапии препаратами первой линии.
Клиника ВК
Клинические симптомы ВК неспецифичны и могут быть связаны с другими вагинальными заболеваниями, в том числе бактериальным вагинозом, трихомониазом, хламидиозом, гонореей. Отличительной чертой симптоматики являются зуд и жжение. В некоторых случаях возможно развитие диспареунии (болезненности при половом акте) и дизурии.
Исследования in vivo показали, что противогрибковые препараты имидазола (миконазол и клотримазол) менее эффективны в лечении не-albicans видов Candida. Так, C. tropicalis и C. glabrata в 10 раз менее чувствительны к миконазолу, чем C. albicans.
Лечение неосложненного ВК
Неосложненный ВК вызывается штаммами C. albicans, большинство из которых демонстрируют чувствительность к азоловым противогрибковым препаратам. Лечение неосложненного заболевания приводит к положительному результату в 90% случаев даже при назначении однократной дозы пероральных или короткого курса местных антимикотиков. На выбор можно использовать несколько топических азоловых препаратов с приблизительно одинаковой эффективностью.
Эмпирическое назначение антимикотиков при этой форме заболевания совершенно оправданно. Более того, зачастую выбор лечения основывается на индивидуальных предпочтениях пациентки.
Клеточная стенка Candida представляет собой комплексный гликопротеин, который зависит от постоянного синтеза эргостерола. Соединения азола, которые являются действующими веществами азоловых противогрибковых препаратов, блокируют выработку эргостерола, позволяя топическим антимикотикам оказывать эффект в 80—90% случаев.
Азоловые препараты, которые подразделяются на производные имидазола и триазола, являются самой многочисленной и эффективной группой противогрибковых средств. К азоловым антимикотикам относятся как системные препараты (кетоконазол, флуконазол, итраконазол), так и местные (бифоназол, клотримазол, изоконазол, эконазол и другие).
В сравнительных испытаниях 10—14‑дневных курсов терапии азолами и нистатином была выявлена преимущественная эффективность первых (80—95 % микологического излечения по сравнению с 70—80 % в группе нистатина). Кроме того, азолы доказали эффективность даже при лечении короткими курсами.
Терапия ВК у беременных женщин предусматривает применение местных противогрибковых препаратов. К числу безопасных топических антимикотиков относятся миконазол и клотримазол, рекомендуемый курс лечения — семь дней. Кроме того, при беременности назначают полиеновый антибиотик натамицин. Стандартная схема противогрибковой терапии местными формами натамицина рассчитана на применение в течение трех дней. При необходимости курс может быть увеличен вдвое.
Лечение осложненного РВК
Оптимальный курс лечения осложненного ВК до сих пор точно не определен. Некоторые исследования показали эффективность противогрибковой супрессивной терапии в течение нескольких месяцев.
Препаратом выбора при РВК является пероральный флуконазол. При тяжелом рецидивирующем ВК флуконазол применяют по схеме 150 мг (три дозы) каждые 72 часа в течение девяти дней, после чего лечение продолжают по 150 мг в неделю на протяжении длительного времени. Такой режим противогрибковой терапии значительно снижает вероятность рецидивов по сравнению с тремя дозами флуконазола без поддерживающего лечения.
Долгосрочная супрессивная терапия пероральным флуконазолом отличается удобством и хорошей переносимостью по сравнению с другими антимикотиками. Как показали исследования, эффективность супрессивной схемы лечения РВК достигает 90%. Вопреки ожиданиям, у больных, длительно принимающих флуконазол, не подтвердилось развитие резистентности к C.albicans или суперинфекции не-albicans видами. Тем не менее пациенткам с упорной инфекцией рекомендуется проводить идентификацию возбудителя.
В качестве препаратов для супрессивной терапии могут применяться иные пероральные средства, которые доказали эффективность в лечении РВК. В качестве альтернативных схем лечения назначают:
Женщинам, предпочитающим местное лечение, клотримазол рекомендуется в дозировке 500 мг в неделю или 200 мг дважды в неделю. Также допустимо применение других местных противогрибковых препаратов, при этом практически не имеет значения, какое действующее вещество используется.
У пациенток с РВК, которым не проводится поддерживающая терапия, вероятность рецидива в течение шести месяцев после успешного лечения очередного эпизода заболевания составляет 70%. Риск рецидива у женщин, принимающих антимикотики в качестве супрессивного лечения, составляет 40—50% в течение одного года после прекращения приема препаратов.
Лечение РВК, вызванного не-albicans видами Candida
Не-albicans виды весьма умеренно отвечают на терапию азоловыми антимикотиками. Поэтому схему лечения в таких случаях подбирают индивидуально, основываясь на степени тяжести заболевания и реакции на препараты.
В течение многих десятилетий для лечения РВК местно использовалась борная кислота. Однако препараты борной кислоты могут всасываться через слизистую оболочку влагалища в кровь и оказывать токсическое действие. Во избежание всасывания вагинальные средства на основе борной кислоты выпускают в желатиновых капсулах. Рекомендуемая схема лечения — одна капсула 600 мг в сутки в течение двух недель.
Готовой лекарственной формы в России нет, но капсулы могут готовить в аптеках ex tempore. Согласно исследованиям, лечение вагинальными капсулами с борной кислотой эффективно в 70% случаев РВК, ассоциированного с C. glabrata.
Альтернативой токсичной борной кислоте являются суппозитории с амфотерицином В. Антибиотик проникает через клеточную мембрану гриба и, связываясь с эргостеролом, разрушает клеточную стенку. Курс лечения составляет 50 мг на ночь per os в течение двух недель. Такая схема терапии успешна у 70% пациенток, страдающих заболеванием, вызванным не-albicans видами, не поддающимися азоловой терапии, особенно C. glabrata.
Активность по отношению к не-albicans видам Candida доказали и местные препараты для вагинального применения, содержащие 17% флуцитозина. Клетки гриба поглощают флуцитозин, после чего он дезаминируется и превращается в 5‑фторурацил, который встраивается в ДНК Candida вместо урацила. В результате нарушается синтез белка и клетка погибает. Возможна также комбинация 17% крема флуцитозина и 3% крема амфотерицина В. Средняя продолжительность лечения флуцитозином должна быть не меньше двух недель. Особенность препарата — его высокая стоимость.
Альтернативные методы лечения РВК
В некоторых случаях пациентки прибегают к применению пробиотиков, большинство из которых содержат лактобактерии. Предполагается, что лактобактерии способны ингибировать или уменьшать рост Candida во влагалище. Однако единого мнения специалистов по этому поводу пока нет. Действительно, часть клинических исследований подтверждает эффективность пробиотиков при ВК. В то же время другие эксперименты полностью опровергают эти данные.
Так, недавно было опубликовано рандомизированное исследование с участием двух групп женщин с РВК. Пациенткам первой группы в схему лечения включали вагинальные пробиотики, а участницы второй подвергались монотерапии итраконазолом. Исследование показало, что исход терапии в течение месяца был одинаково положительным в двух группах.
Учитывая безопасность применения пробиотиков, право включения этих препаратов в схему лечения РВК имеет и врач, и пациентка.
Список использованных материалов
Нашли ошибку? Выделите текст и нажмите Ctrl+Enter.
Кандида, ДНК (Candida albicans, ПЦР) соскоб, кол. в Москве
Обнаружение ДНК дрожжеподобных грибов Candida albicans помощью ПЦР в соскобе или мазке с целью диагностики кандидоза.
Приём и исследование биоматериала
Когда нужно сдавать анализ Кандида, ДНК (Candida albicans, ПЦР) соскоб, кол.?
Подробное описание исследования
Кандидоз проявляется воспалительными изменениями на слизистых оболочках пораженных органов с образованием белых пятен, что отражено в названии гриба: «albicans» в переводе с латыни означает «белый».
Чаще всего наблюдается поражение мочеполовой системы (урогенитальный кандиоз), а также рта и глотки (орофарингеальный кандидоз).
Поражение мочеполовой системы проявляется следующим образом:
Другой частой локализацией кандидозного воспаления является полость рта. Люди с орофарингеальным обычно имеют хронические заболевания, носят зубные протезы, получают ингаляционные стероиды. Заболевание часто протекает бессимптомно, обнаруживаясь лишь в виде белых пятен во рту. Если симптомы все же появляются, они могут включать следующее:
Несмотря на характерные признаки кандидоза, его клиническая диагностика бывает затруднительна. Обнаружение генетического материла (ДНК) дрожжеподобных грибов Candida служит подтверждением диагноза и позволяет своевременно назначить необходимое лечение.
Метод ПЦР относится к исследованиям, которые обладают высокой чувствительностью и специфичностью для выявления C. albicans в соскобе или мазке. С его помощью возможно определение количества копий ДНК кандиды.
Candida albicans (качественный метод)
Описание исследования
Candida – это род дрожжевых одноклеточных грибов, живущих в организме человека и животных. Они являются частью нормальной микрофлоры организма и, как правило, не приносят вреда, но при значительном увеличении количества могут стать причиной заболевания.
Наиболее распространенным и клинически значимым из всех грибов рода кандида является вид Candida albicans (хотя все виды кандиды обитают практически всюду). В организме человека они образуют значительные колонии (т.е. накопление грибов, не достигшее критического количества, способного вызвать болезнь), имеющие белый цвет и круглую форму. Candida albicans могут обосноваться на коже или слизистых оболочках – во рту, влагалище, желудочно-кишечном тракте и пр., никак не выдавая свое присутствие. Так, по данным наблюдений, у трети-половины здоровых людей кандиды присутствуют на слизистых оболочках желудка, кишечника и рта. У каждой 3-5 из ста женщин Candida albicans обнаруживается на слизистых половых органов. Это совсем не означает, что у названых лиц кандидоз – не исключено, что имеет место колонизация грибком кожи и слизистых. Толчком для развития ряда заболеваний, вызываемых кандидой (например, таких, как бактериальный вагиноз или молочница, пневмония у новорожденных, воспаление мочеиспускательного канала, различные гнойные заболевания, стоматит, системный кандидоз), могут послужить следующие факторы:
Кандидоз может протекать в одной из двух форм:
У лиц с дефицитом иммунитета возможно развитие обеих форм инфекции. В организме с нормально функционирующей иммунной системой наблюдается только поверхностный кандидоз.
Кандидоз может диагностироваться посредством ряда лабораторных методов:
Данное исследование проводится с применением метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) с наблюдением за процессом в режиме реального времени.
Исследование соскоба клеток эпителия урогенитального (мочеполового) тракта на наличие специфических фрагментов ДНК Candida albicans предназначено для подтверждения инфекции в случаях явных признаков урогенитального кандидоза.
Исследование соскоба клеток эпителия ротоглотки и слюны на наличие специфических фрагментов ДНК Candida albicans применяется:
Исследование соскоба клеток эпителия кожи на наличие специфических фрагментов ДНК Candida albicans применяется:
Исследование спермы на наличие специфических фрагментов ДНК Candida albicans применяется для подтверждения инфекции в случаях присутствия явных признаков кандидозного баланита (воспаления головки полового члена) и баланопостита (мужской молочницы).
Исследование мочи на наличие специфических фрагментов ДНК Candida albicans применяется для подтверждения инфекции в случаях явных симптомов кандидоза в мочевыделительной системе.
Аналитические показатели теста:
Подготовка к исследованию
Соскоб урогенитальный (цервикальный канал, влагалище, уретра)
Соскобы у женщин отбираются не ранее пятого дня от начала менструального цикла и не позже пятого дня до предполагаемой даты следующей менструации. Если наблюдаются явные признаки заболевания, отбор пробы проводится непосредственно в день обращения.
Требования по подготовке к тестированию:
Проба не отбирается:
При отборе эпителиальных клеток из мочеиспускательного канала, манипуляция проводится перед мочеиспусканием или через 1,5-2 часа после него.
Соскоб ротовой полости
Перед отбором биологического материала необходимо учесть следующие рекомендации:
Перед отбором пробы запрещается:
Перед проведением соскоба необходимо прополоскать рот, используя для этого воду комнатной температуры.
Для получения наиболее информативного и корректного результата тестирования необходимо в точности придерживаться вышеизложенных рекомендаций. Лечащий врач может назначить иные условия проведения обследования.
Проба слюны отбирается до диагностических или терапевтических манипуляций в зоне предполагаемой локализации возбудителя инфекции, а также до начала приема антибиотиков, антивирусных и противопаразитарных средств.
Если тестирование проводится для определения действенности лечения, то отбор материала осуществляется не ранее чем через 10-14 дней после окончания курса терапии местными препаратами и через 30 дней после перорального приема антибиотиков.
Готовясь к тестированию, необходимо воздержаться:
У детей слюна отбирается в защечном пространстве шприцем без иглы. Для анализа необходимо не менее 1 мл материала, который помещается в в микропробирку. Во избежание потерь биоматериала, пробирка плотно закупоривается.
Соскоб эпителиальных клеток кожи
Отбор материала с целью диагностики проводится до начала противобактериального, антивирусного и противопаразитарного лечения, а также до лечебных или диагностических мероприятий в месте предполагаемой локализации агента инфекции.
Отбор материала с целью диагностики проводится до начала противобактериального, антивирусного и противопаразитарного лечения, химиотерапии, а также до лечебных или диагностических мероприятий в месте предполагаемой локализации агента инфекции. После курса лечения проба отбирается не ранее, чем через 10-14 дней при проведении локальной терапии и через 30 дней после перорального приема антибиотиков.
На анализ собирается порция первой утренней мочи, выделенной не ранее, чем через 2-3 часа после предыдущего (ночного) мочеиспускания. Ее объем должен составлять порядка 20-30 мл. Емкость, используемая для сбора биоматериала – стерильный медицинский контейнер.
Моча собирается либо до проведения химиотерапии или лечения антибиотиками, либо через месяц после окончания курса лечения.
Перед началом манипуляции необходимо тщательно обмыть гениталии. Женщинам желательно воспользоваться гигиеническим тампоном во избежание попадания в пробу слизи из влагалища. Во время менструации материал не собирается.
После наполнения контейнера на треть-половину объема, емкость с мочой плотно закрывается крышкой, дабы избежать ее вытекания.
Доставка биоматериала должна быть организована в течение максимум 6 часов. До отправки в лабораторию моча может храниться как в холодильнике (при t⁰ от +2⁰С – замораживать ее нельзя), так и в комнате, но при этом температура не должна быть выше +25⁰С.
Показания к исследованию
Интерпретация исследования
Данный тест является качественным, результат выдается в одной из формулировок: «обнаружено» или «не обнаружено».
Референсное значение – «не обнаружено».
Получение положительного ответа свидетельствует о наличии в исследуемом биоматериале специфических фрагментов ДНК грибка-паразита, что является показателем заражения грибковой инфекцией.
Отрицательный ответ может быть получен в случае:
Примечание. Срок проведения анализа может быть продлен, если возникнет необходимость перепроверки положительного результата.
Результат анализа выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример результата по данному анализу представлен ниже:
Ф.И.О.: Иванов Иван Иванович Пол: м Год рождения: 01.01.0000
Дата исследования: 12.12.0000