Env gp160 что это
Env gp160 что это
Добрый день.
Прошу помочь в интерпретации анализов, т.к. девушка которая выдавала их в одном из ваших офисов, ничего мне не сказала, просто молча отдала и все. В июне сдал анализ в том числе и на вич, результаты которые пришли уже из центра по профилактике и борьбе следующие:
ИФА
Результат набор 1 — положительный
Заключение ифа — положительный
Стоит печать антитела ВИЧ/+ Обнаружено
Набор реагентов для ИБ — МПБА блот, ВИЧ1, ВИЧ2
gp160+
gp110/120+
p68-
p55-
p52-
gp41-
p40-
p34-
p25+
p18+
Результат сомнительный
Вопрос заключается в том, что это значит? Где-то за месяц до анализа, я сильно переболел вернувшись из одной из стран карибского бассейна. Симптомы были атипичные, как для гриппа или отравления или перегрева. Была очень сильная светобоязнь,головная боль в лобной части, температура, постоянно лихорадило, понос, очень сильная чувствительность на поверхности кожи, ужасная боль в мышцах и боль в спине, кроме того очень сильно болели внутренние органы. Я пропил антибиотики и все прошло. Симптомы очень похожи на ВИЧ, но у моей партнерши через месяц после того как я переболел развились абсолютно теже симптомы. НА сколько я понимаю что это несколько атипично если говорить о ВИЧ. Я предположил что скорее всего переболел тем от чего не был привит в детстве, и от чего привиты они. Дело в том, что в той стране в которой я был, было такое ощущение, что у половины температура и кашель. Был сильный ветер с океана и болели как-будто бы все.
ХОтел бы еще отметить что Инкубационный период вируса примерно 4 недели. Так после возвращения из отпуска до болезни у меня прошло 4 недели, и тот же срок у подруги, где-то через месяц после нашей встречи.
На какие еще заболевания может быть такой результат. ВОзможно нужно сделать какие-то дополнительные анализы и я не оттуда зашел.
Возможно какие-то из положительных маркеров, являются не типичными для ВИЧ. У меня из головы не выходит вся эта ситуация. По некоторой информации я знаю что если маркер p31 не определен то высокая вероятность что результат ложноположительный. Только вот его в листе нет вообще. Об этом еще если можно немного напишите.
Уважаемый Алекс! Вирус иммунодефицита человека относится к семейству РНК-содержащих ретровирусов и классифицирован на сегодня в подсемейство лентивирусов, т. е. вирусов медленных инфекций. ВИЧ генетически и антигенно неоднороден — описаны ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Геном ВИЧ содержит 3 основных структурных гена — gag, кодирующий образование внутренних белков (p17/18, 24/26, 55/56); env, кодирующий гликопротеины оболочки (gp41/36, 120/105, 160/140) и pol, кодирующий ферментные системы, включая обратную транскриптазу (p31, 51, 66/68). Кроме того, известны регуляторные гены возбудителя (tat, rev, nef), которые обеспечивают контроль за его репликацией.
Интерпретация Результатов Иммуноблота — Отрицательный блот Тест — маркеры отсутствуют
Положительный блот — Присутствуют антитела к двум из приведенных трех белков (протеинов) — gp 120/160, gp 41 или р 24. Это продукты трех основных генов ВИЧа —gag, pol, and env.
Сомнительный блот — Другое сочетание маркеров. Встречается при сероконверсии, при аутоиммунных заболеваниях, при ВИЧ 2. Обычно перекрестная реакция аутоиммунных антител с маркерами р 24 и / или р 55. Ложно-положительный иммуноблот очень редок. Отсутствие маркера р 31 в 50% свидетельствует о ложно положительном иммуноблоте. (Источник — Т.Р. Харрисон, 17 издание, 2007 J Hopkins Medical management of HIV infection ). Учитывая все вышеизложенное, нельзя однозначно говорить о наличии у Вас ВИЧ-инфекции, так как метод ИФА не является основным и подтверждающим методом диагностики ВИЧ. В данной ситуации рекомендую Вам обратиться в Институт тропической медицины для определения тактики дальнейшего обследования.
Иммунный блоттинг в диагностике ВИЧ
Иммуноблот включает в себя несколько стадий:
Подготовка стрипа. Предварительно очищенный и разрушенный до составных компонентов вирус иммунодефицита (ВИЧ) подвергается электрофорезу, при этом входящие в состав ВИЧ антигены разделяются по молекулярному весу. Затем методом блоттинга (аналог выдавливания на «промокашку» избытка чернил) антигены переносят на полоску нитроцеллюлозы, которая отныне содержит невидимый пока глазом спектр антигенных полос, характерный для ВИЧ.
Трактовка результата. Наличие полос в на определённых участках нитроцеллюлозной пластины подтверждает присутствие в исследованной сыворотке антител к строго определённым антигенам ВИЧ.
В настоящее время иммунный блоттинг (иммуноблот) является основным методом для подтверждения наличия вирусспецифических антител в исследуемой сыворотке. В некоторых случаях ВИЧ-инфекции, до развития сероконверсии, специфические антитела более эффективно выявляются методом иммунного блоттинга, чем ИФА. При исследовании методом иммунного блоттинга обнаружено, что чаще всего в сыворотках больных СПИДом выявляются антитела к gp 41, причем обнаружение р24 у лиц, обследуемых с профилактической целью, требует дополнительных исследований на наличие у них ВИЧ-инфекции. Тест-системы для иммунного блоттинга на основе рекомбинантных белков, полученных путем генной инженерии, оказались более специфичными, чем обычные системы на основе очищенного вирусного лизата. При использовании рекомбинантного антигена формируется не диффузная, а четко выраженная узкая полоска антигена, легко доступная для учета и оценки.
ВОЗ считает положительными сыворотки, в которых методом иммунного блотинга обнаруживаются антитела к каким-либо двум гликопротеидам ВИЧ. Согласно этим рекомендациям, при наличии реакции только с одним из белков оболочки (гп 160, гп 120, гп 41) в сочетании или без реакции с другими белками, результат считается сомнительным и рекомендуется повторное исследование, используя набор другой серии или другой фирмы. Если и после этого результат остается сомнительным, рекомендуется наблюдение в течение 6 месяцев (исследования через 3 месяца).
Наличие положительной реакции с антигеном p24 может указывать на период сероконверсии, так как антитела именно к этому белку иногда появляются первыми. В этом случае рекомендуется, в зависимости от клинических и эпидемиологических данных, повторить исследование с образцом сыворотки, взятым как минимум через 2 недели, и это является как раз тем случаем, когда при ВИЧ-инфекции необходимо исследование парных сывороток.
Положительные реакции с белками gag и pol без наличия реакции с белками env могут отражать стадию ранней сероконверсии, а также может указывать на ВИЧ-2 инфекцию или на неспецифическую реакцию. Лиц с такими результатами после тестирования на ВИЧ-2 повторно исследуют через 3 месяца (в течение 6 месяцев).
Иммуноблоттинг на ВИЧ: особенности проведения и расшифровка результатов
Иммуноблоттинг – диагностическое мероприятие, проводимое в лабораторных условиях, по результатам которого выявляют антитела к возбудителям различных заболеваний. Одним из таковых выступает вирус иммунодефицита человека. Сразу стоит отметить, что такое исследование, как иммуноблоттинг на ВИЧ – это дополнительное мероприятие, которое назначают для подтверждения положительного результата ИФА.
В каких случаях назначается анализ
Вирус иммунодефицита человека – медленно прогрессирующая инфекция. Со времени проникновения в организм патогенов и до проявления первой симптоматики часто проходит достаточно продолжительное время, которое может достигать нескольких лет.
На начальном этапе развития клинические проявления могут отсутствовать. Повышение общей температуры, недомогание, боль в горле, характерные ВИЧ-инфекции симптомы, человек путает с банальной простудой, а ведь инфекция продолжает прогрессировать. Поэтому специалисты ВИЧ-центров рекомендуют пройти комплексную диагностику в таких случаях:
Иммуноблот на ВИЧ проводится с использованием сыворотки или плазмы крови. Исследование на одном стрипе требует 1,5-2 мл крови или 15-25 мкл сыворотки.
Диагностическое мероприятие позволяет выявить антитела не только к вирусу иммунодефицита человека, но и к другим патогенам. В ходе исследования используют специальные наборы, характерные для различных заболеваний, например:
Результат иммуноблоттинга может быть положительным (когда обнаружены антитела) и отрицательным (когда антитела в биологическом материале отсутствуют), а также неопределенным, ложноположительным и ложноотрицательным.
Где можно провериться на заражение вирусом, и что делать дальше
Каждая поликлиника, частная лаборатория, больница, клиника специализируется на подобном диагностическом мероприятии. Пройти тест можно в центре тестирования ВИЧ. Некоторые частные клиники предлагают услуги по консультированию и тестированию вируса СПИДа и ВИЧ на дому.
Рекомендуется провести один тест спустя 6 недель после предполагаемого заражения и спустя 12 недель. Пройти диагностику разрешается и в более поздний срок: на результат это не влияет.
ВАЖНО! После получения результатов исследования нужно обратиться к лечащему врачу для назначения соответствующей терапии.
Положительные пробы
Если результаты иммуноблота положительные, это еще не значит, что в организме развивается ВИЧ-инфекция. Для подтверждения диагноза назначают иные исследования, например, непрямую иммунофлюоросценцию.
Хоть метод иммуноблота и обладает высокой чувствительностью, однако, за счет определения иммуноглобулинов класса G возможен ложноположительный результат в первые 3 недели после инфицирования. В таком случае проводится тест повторно спустя определенное время.
Все причины получения ложноположительного результата неизвестны. Наиболее распространенными источниками выступают период беременности и недавнее введение вакцины иммунопрепарата. Если по истечении определенного времени после воздействия подобных факторов иммуноблот на ВИЧ все так же положительный, это означает, что человек инфицирован.
Негативный результат
Иммуноблот может давать отрицательный результат, что сигнализирует об отсутствии в организме антител к ВИЧ-инфекции и, как следствие, — о полном здоровье.
Отрицательный иммуноблот часто наблюдается в «период окна» (в первые 3 месяца между инфицированием и появлением в крови антител). На протяжении данного срока тест не обнаруживает соответствующие антитела, но в иной жидкости (сперме, влагалищном отделяемом) можно выявить таковые и в большом объеме.
Как проводится анализ
Иммуноблот позволяет идентифицировать антитела путем исследования крови и применения гель-электрофореза.
В первую очередь проводится разрушение бактериальных клеток или вирионов ультразвуком, после чего путем электрофореза – разделение всех антигенов вируса или бактериальных клеток. В итоге получается коммерческий реагент, помещаемый на специальную нитроцеллюлозную пленку.
Во время постановки иммуноблоттинга на материал с известным антигеном наносят и исследуемую сыворотку. После того, как провели инкубацию и отмывание несвязавшихся антител, начинают иммуноферментный анализ, наносят на сыворотку иммуноглобулины, которую помечают ферментом, и хромогенный субстрат, меняющий цвет при контакте с ферментом.
Если имеются антитела, на носителе образуются пятна.
Для проведения иммуноблоттинга на ВИЧ используется забор крови
Линейный метод
Линейный блот на ВИЧ – непрямое иммунологическое исследование, методом которого получают качественный показатель аутоантител класса IgG.
В ходе иммунологического исследования используют вирусное вещество ВИЧ-формата или антигены. В лабораторных условиях соединяют белки ВИЧ и отдельные антитела, которые были получены из сыворотки крови. Далее проводится инкубация путем добавления меченых антител и человеческого иммуноглобулина.
Диагностика ВИЧ у новорожденных
В организме ребенка до 9 месяцев, рожденного от инфицированной женщины, присутствуют антитела к ВИЧ матери, что становится причиной получения ложноположительного результата ИФА. По этой причине предпочтение отдают вирусологическим тестам – количественному анализу РНК и ДНК ПЦР. Более чувствителен культуральный метод диагностики инфекции.
ВАЖНО! Показаниями к проведению диагностических мероприятий по выявлению ВИЧ-инфекции у новорожденных выступают: рождение от инфицированной женщины, получение сомнительного результата ранее осуществимого анализа.
Исследование при беременности
Так как ВИЧ-инфекция, развивающаяся у беременной женщины, может передаться будущему ребенку, требуется ранняя диагностика на вирус иммунодефицита.
В первую очередь проводится иммуноферментный анализ, применяемый в качестве скрининга. Диагностическое мероприятие помогает обнаружить в сыворотке крови антитела к инфекции. Несмотря на точные результаты анализа в период беременности, требуется повторное проведение исследования.
Разновидность ИФА – иммунный блоттинг, который часто используют в период беременности. По результатам диагностики можно выявить антитела к определенным антигенам, которые распределены по молекулярному весу методом электрофореза.
Как правильно пройти тест
Иммунный блоттинг на ВИЧ требует специальной подготовки, как и другие методы диагностики заболевания. Если провести некоторые исследования и получить результаты определенных показателей можно на протяжении всего дня (например, ответ на аллерген), то сдавать кровь на иммунологический анализ нужно только в утреннее время.
В предыдущий день перед диагностикой рекомендуется окончить повышенные физические нагрузки. Биологический материал сдают на голодный желудок. Как правило – это кровь с вены, которую в некоторых случаях забирают в несколько пробирок.
Расшифровка результатов
Расшифровку результатов иммуноблотта проводит лабораторный работник. Если обнаружили 2 из 3 протеинов ВИЧ-1 или ВИЧ-2, это указывает на присутствие в организме соответствующей инфекции. Исследование проводится для подтверждения положительного иммуноферментного анализа. Поэтому реакция проверяется и на такие протеины, как gp120/160, gp41 в сочетании с р24. Последние – это часть трех генов СПИДа — gag pol and env.
Схематическое отображение результатов иммуноблоттинга на ВИЧ
Первичная диагностика предполагает исследование белков р25, gp110/120 и gp160, указывающих на раннюю стадию развития заболевания. При положительном результате, который дал второй серологический иммуноферментный анализ, проводится иммуноблот. Если и последний дал положительный результат, диагноз ВИЧ подтверждают.
Вероятность положительного результата зависит от периода, который прошел от момента инфицирования до проведения диагностики:
Ложноположительный результат возможен, если забор биологического материала для дальнейшей диагностики проводился в период беременности, при нарушении гормонального фона, продолжительном подавлении иммунной функции определенными препаратами, которые принимает человек.
Критерии оценки анализа
Результаты анализа ИФА и иммуноблоттинга должны соответствовать следующим критериям:
Выявляемая примесь и ее содержание должны отвечать требованиям свидетельства на стандартный образец.
Неинтерпретируемые результаты
В некоторых случаях иммуноблоттинг на ВИЧ и СПИД не соответствует отрицательному и положительному результату, причем врач не может определить истинную причину сомнительных сведений. Часто причиной неправильной интерпретации выступает инфицирование, вызванное другим серотипом.
Для устранения сомнений ПЦР и ИФА проводятся в динамике. При отсутствии характерной заболеванию симптоматики на протяжении полугода и факторов риска говорят о полном здоровье. На этом этапе диагностические мероприятия оканчивают.
Сомнительный результат также можно получить при развитии в организме иного инфекционного заболевания, ракового новообразования, аллергической реакции.
Важно! При сомнительном результате человек не может быть донором крови и другого биологического материала.
Типичные ошибки при диагностике ВИЧ инфекции
Забор биологического материала, доставка и оформление материалов, используемых при проведении лабораторной диагностики, должны соответствовать следующим правилам:
Для забора материала используется сухая пробирка. У новорожденных часто берут пуповинную кровь, указывая о таком факте в направлении.
Типичная ошибка врачей – хранение полученного материала дольше 12 часов при комнатной температуре и дольше 1 дня при температуре 4-8 градусов выше по Цельсию. За счет наступающего гемолиза искажаются результаты диагностического мероприятия.
Итак, к типичным ошибкам во время проведения диагностики ВИЧ-инфекции относят:
На результат влияет даже качество воды, используемой для промывания тары, в которую помещают биологический материал.
После получения результатов исследования лабораторный работник должен выдать для врача заключение. Если диагностика проводилась в «период окна», он назначает повторное проведение диагностики спустя определенное время. В любом случае, чтобы поставить диагноз «ВИЧ-инфекция», одного иммуноблота недостаточно. Необходима комплексная диагностика.
Гликопротеины ВИЧ», gp160, gp120 и gp41.
(a) В 1983 г. (20) и снова в 1984 г. Монтанье и его коллеги (29) заявили, что, хотя p45 / 41 реагировал с сывороткой пациентов, этот белок был не вирусным, а повсеместно распространенным клеточным белком, актином. Интересно, что даже в этом году Монтанье использовал следующие критерии для определения положительного результата Вестерн-блоттинга: «наличие антител против продуктов гена env (gp160, gp120) и реактивность хотя бы с одним продуктом гена gag (критерии ВОЗ ) «(30). Однако на сегодняшний день никакие другие критерии, даже критерии ВОЗ, не исключают p41. Критерии ВОЗ: «2 полосы env (предшественник, внешний gp или трансмембранный gp» с любыми другими полосами или без них (трансмембранный = gp41) (31) В отличие от Монтанье, Галло считает gp41 наиболее специфичным белком ВИЧ.
(b) К 1989 году исследователи из Нью-Йорка показали, что в ходе вестерн-блоттинга «компоненты, визуализированные в области 120–160 кДа, не соответствуют gp120 или его предшественнику, а представляют собой олигомеры gp41». Также было показано, что полученная картина WB зависит от многих факторов, включая температуру и концентрацию додецилсульфата натрия, используемого для разрушения «чистого вируса». «Путаница в идентификации этих полос привела к неверным выводам в экспериментальных исследованиях. Точно так же некоторые клинические образцы могли быть ошибочно идентифицированы как серопозитивные, исходя из предположения, что эти полосы отражают специфическую реактивность против двух различных вирусных компонентов и соответствуют критерию истинности или вероятная позитивность. доказал наличие в культурах бесклеточных частиц, имеющих выступы (шипы). В одной из своих последних публикаций Гелдерблом и его коллеги подсчитали, что сразу после высвобождения «частицы ВИЧ» имеют в среднем 0,5 выступа на частицу, но также отметили, что «возможно, что структуры, напоминающие выступы, могут наблюдаться даже при наличии gp120 отсутствует, т. е. ложные срабатывания ». (46) Принято, что gp120 присутствует только в выступах (шипах). Поскольку нет доказательств присутствия выступов в бесклеточных частицах, даже сразу после высвобождения из клетки, gp120 не может присутствовать в Вестерн-блоте. В одной из своих последних публикаций Гелдерблом и его коллеги подсчитали, что сразу после высвобождения «частицы ВИЧ» имеют в среднем 0,5 выступа на частицу, но также отметили, что «возможно, что структуры, напоминающие выступы, могут наблюдаться даже при наличии gp120 отсутствует, т. е. ложные срабатывания ». (46) Принято, что gp120 присутствует только в выступах (шипах). Поскольку нет доказательств присутствия выступов в бесклеточных частицах, даже сразу после высвобождения из клетки, gp120 не может присутствовать в Вестерн-блоте. В одной из своих последних публикаций Гелдерблом и его коллеги подсчитали, что сразу после высвобождения «частицы ВИЧ» имеют в среднем 0,5 выступа на частицу, но также отметили, что «возможно, что структуры, напоминающие выступы, могут наблюдаться даже при наличии gp120 отсутствует, т. е. ложные срабатывания ». (46) Принято, что gp120 присутствует только в выступах (шипах). Поскольку нет доказательств присутствия выступов в бесклеточных частицах, даже сразу после высвобождения из клетки, gp120 не может присутствовать в Вестерн-блоте.
Белок pol HIV», стр. 31/34.
В 1987 году Хендерсон выделил p30-32 и p34-36 «ВИЧ, очищенного двойным связыванием» в градиентах плотности сахарозы. Сравнивая аминокислотные последовательности этих белков с белками DR гистосовместимости класса II, они пришли к выводу, что «альфа- и бета-цепи DR оказались идентичными белкам p34-36 и p30-32 соответственно»; (47)
Gag-белок ВИЧ», p24
Галло всегда утверждал, что существует гомология между генами gag HTLV-I, II и ВИЧ (56), и что многие черты, присущие всем «человеческим ретровирусам», включают «небольшой (p24 / p25) главный капсидный белок; p24 перекрестно-реактивный антигенный детерминант. детектируется либо гетерологичной (кроличьей) антисывороткой, либо человеческими моноклональными антителами ». (57) Действительно, gag обозначает группоспецифичные антигены. Еще в 1974 году Гелдерблом и его коллеги писали: «В то время как антигены оболочки вируса в первую очередь специфичны к вирусному штамму, основная масса внутренних белков вириона с молекулярной массой (mw) от 10 000 до 30 000 дней является групповой (gs ) для вирусов, происходящих от данного вида животных (gs-spec. антигены). Было обнаружено, что основной белковый компонент онкорнавирусов С-типа [ретровирусов] млекопитающих с молекулярной массой в диапазоне 30 000 дней, помимо gs spec. антиген, антигенная детерминанта, которая является общей для вирусов C-типа многих видов млекопитающих, включая обезьян, и поэтому была названа межвидовым антигеном gs (gs-interspec.) »(58). В 1989 году Уильям Блаттнер, известный эксперт по ВИЧ / СПИДу, заявил : «Возможно, было бы целесообразно использовать зонды вирусного антигена для поиска перекрестно-реактивных антител, поскольку некоторые вирусные белки, особенно белки полимеразы и gag, могут быть высококонсервативными между подтипами вируса». (59) Таким образом, даже если p24 должен был быть специфичным для ретровирусов, он не может быть ВИЧ-специфичным. Если p24, обнаруженный в супернатантах культур, является компонентом подобных частиц, вирусных или невирусных, тогда в градиентах плотности весь p24 должен находиться по крайней мере в одной полосе (фракции), даже если не при плотности 1,16 г / мл. То, что это не так, было продемонстрировано самим Монтанье. В одном эксперименте Монтанье и его коллеги разделили градиент плотности на шестнадцать фракций. Пик RT был обнаружен во фракциях пять и шесть, в то время как p24 и gp110 присутствовали во всех фракциях, кроме трех (1, 2, 3). (28)
Диагностика СПИДа иммуноблотом на ВИЧ
Иммуноблот на ВИЧ позволяет обнаружить антитела к вирусным белкам, помещенным на специальную нитроцеллюлозную мембрану. Это высокоточное исследование, устанавливающее наличие фракций, в которых основные белки располагаются в виде небольших полос.
Оболочка вируса ВИЧ-1 содержит гликопротеины с молекулярной массой от 41 кд до 160 кд (килодальтона). Большое значение для проведения иммунного блоттинга имеет гликопротеин ВИЧ-2 с молекулярным весом от 32 кд до 140 кд. Белки сердцевины ВИЧ-1 и ферменты вируса представлены протеинами р17, р24, р55.
Возбудитель ВИЧ-2 состоит из белков, обозначаемых как р16, р25, р56. Они образуют его внутреннюю оболочку. В состав генома входят 6 регуляторных и 3 структурных гена. Нередко при делении клеток возникают генетические неточности и появляется несколько подтипов возбудителя.
Положительные пробы
Для исключения ошибок при лабораторной диагностике ВИЧ-инфекции пациенту назначают дополнительное исследование. Его результаты интегрируются как положительные, если обнаружены антитела к 2 или 3 белкам ВИЧ-1 или ВИЧ-2.
Иммуноблот подтверждает все хорошие результаты ИФА. В этом случае обнаруживают антитела к gp120/160, gp41 или р24, которые являются структурными единицами трех основных генов СПИДа — gag, pol, and env. У некоторых пациентов, имеющих отрицательные результаты ИФА и ПЦР, иммуноблот показывает несколько положительных полосок. Врач назначает дополнительное исследование р24 для постановки правильного диагноза и исключения ранней фазы ВИЧ-инфекции.
Если полученные результаты подвергаются сомнению, больному предлагают повторять сдачу анализа в течение последующих 3 месяцев. Почти все случаи заболевания ВИЧ подтверждают с помощью системы для проведения иммуноблота — прибора Sanofi. В большинстве случаев обнаруживают антигены ВИЧ, белки р25, gp110/120 и gp160, указывающие на инфицирование вирусом. Ложноположительная проба регистрируется у пациентов, страдающих заболеваниями соединительной ткани, имеющих повышенный уровень билирубина, при взаимодействии с различными вирусными антигенами.
Негативный результат
В случае недостатка положительных линий, соответствующих белкам вируса СПИДа, иммуноблот расшифровывают как отрицательный результат. Анализ однозначно подтверждает отсутствие заражения вирусом иммунодефицита или указывает на «период окна». Если иммуноблот дает отрицательный результат, человек не является носителем вируса СПИДа.
Регистрация отрицательного результата указывает на отсутствие в сыворотке антител к оболочечным гликопротеинам ВИЧ gp120, gp160, Sp41.
Нередко больного интересует вопрос, может ли быть отрицательный результат иммуноблота на ВИЧ у пациента, имеющего инфицированного сексуального партнера. После проведенного исследования нередко получают сомнительный результат или фиксируются антитела к белкам gp120 и gp160, что указывает на полное отсутствие отрицательных данных. Иногда сомнительный ответ регистрируют у пациентов с бессимптомно протекающей инфекцией.
Неинтерпретируемые результаты
Анализ, проведенный с помощью различных тестов на антитела к ВИЧ-инфекции, иногда не соответствует отрицательным данным и не отвечает критериям серопозитивности. Врачу трудно установить причину появления сомнительного результата.
Некоторые больные не входят в группу риска по инфицированию ВИЧ. Врач может ошибаться в интерпретации результатов исследования в том случае, если инфицирование вызвано другим серотипом.
Сыворотку крови пациента необходимо исследовать в динамике. Если в течение 6 месяцев не наблюдают клинических проявлений СПИДа и отсутствуют факторы риска, у больного регистрируют отсутствие инфекции.
Сомнительные результаты анализа получают у пациентов, имеющих низкий риск инфицирования. В некоторых случаях появление неясных данных вызывают содержащиеся в сыворотке крови иммунные комплексы и аутоантитела.
У некоторых больных возникновение сомнительных результатов вызвано развитием патологических процессов:
У больного появляются изменения в клиническом анализе крови, наблюдают рост С-реактивного белка или повышение СОЭ. У людей, страдающих инфекционными заболеваниями, часто выявляют сомнительную реакцию иммуноблота на ВИЧ.
Пациенты с неопределенными результатами не могут являться донорами крови и биологических материалов.
Линейный метод
Принцип иммуноблоттинга включает:
Анализ позволяет врачу своевременно провести интерпретацию результатов исследования. Положительный блот расшифровывают как 2ENV+/- GAG+/POL, неопределенный — 1 ENV+/- GAG+/POL. Отрицательный результат предусматривает отсутствие полос.
Для выполнения анализа применяют рекомбинантный и лизатный иммуноблот. Исследование является специфичным и составляет 99,5%.
Может ли результат анализа быть расшифрован как ложный, интересуются больные. Полученные данные могут быть сформированы в результате стимуляции защитных сил организма (беременности, гемодиализа). При подозрении на острый ретровирусный синдром и контакт с больным ВИЧ-инфекцией пациенту рекомендуют сдать сыворотку на реакцию ПЦР. Повторное серологическое исследование подтверждается путем измерения вирусной нагрузки в представленном образе биологического материала.
Диагностика ВИЧ у новорожденных
Анализ на СПИД у ребенка раннего возраста проводят в том случае, если установлен контакт с ВИЧ-инфицированной матерью. Серологические реакции могут быть положительными в течение 1,5 лет. Антитела в сыворотке крови новорожденного обнаруживают с помощью реакций ИФА, РИФ и иммунного блоттинга.
В течение 9 месяцев жизни ребенка положительный результат появляется в связи с наличием в сыворотке крови антител матери. Антиген р24 имеет специфичность около 65%. В некоторых случаях не удается обнаружить антитела у больного ребенка, если у него диагностировано врожденное низкое содержание глобулинов в крови. Установленный отрицательный результат иммуноблота не является гарантией отсутствия инфекции.
Тестирование проводят в несколько этапов:
Дальнейшее изучение антител проводят до тех пор, пока не будут получены 2 отрицательных результата иммуноблота. Установление диагноза СПИД у ребенка, рожденного от ВИЧ-инфицированной женщины, возможно на основании 2 положительных результатов реакции ПЦР. Передача новорожденному возбудителя ВИЧ-инфекции исключена, если женщина не кормит ребенка грудью.
Исследование при беременности
Будущей матери назначают иммунный и линейный блоттинг, если получен положительный результат на ВИЧ методом ИФА. Если блот подтвержден, пациентка больна СПИДом. В этом случае начиная с 14 недели беременности назначают терапию, предупреждающую инфицирование ребенка.
Может ли ошибиться специалист при выполнении исследования сыворотки крови во время беременности, спрашивают пациентки у лечащего врача. Он обязан выдать на руки беременной женщине копии анализов ПЦР, ИФА для устранения сомнений в их достоверности.
При постановке иммуноблота иногда возникают проблемы, но если ИФА, блот и ПЦР — положительные, диагноз ВИЧ-инфекции подтверждается окончательно. Вероятность получения ложноположительного анализа при беременности велика. В случае если ИФА (+), а иммуноблот (-), женщине предлагают пересдать сыворотку крови.
В обменной карте беременной указывают результат исследования. При его положительном значении женщине запрещают кормить ребенка после родов, чтобы не заразить вирусом СПИДа. Окончательные выводы делают на основании лабораторных, клинических и эпидемиологических исследований. Только после их расшифровки больному ставят диагноз «ВИЧ-инфекция».